一、試劑與材料準備

1. 2% 氫氧化鈉甲醇溶液

2. 15% 三氟化硼甲醇溶液

3. 正庚烷（色譜純）

4. 飽和氯化鈉水溶液

5. 無水硫酸鈉（經高溫烘烤除水）

6. 脂肪提取物（從食品中提取的油脂樣品）

二、儀器設備

1. 圓底燒瓶

2. 回流冷凝器

3. 恒溫水浴鍋（可控溫 80 ℃±1 ℃）

4. 分液漏斗

5. 25 mL 具塞試管

6. 氣相色譜進樣瓶

三、操作步驟

1. 皂化反應

• 稱取適量脂肪提取物置于圓底燒瓶中，準確加入 8 mL 2% 氫氧化鈉甲醇溶液。

• 將圓底燒瓶與回流冷凝器連接緊密，置于 80 ℃±1 ℃ 恒溫水浴鍋中加熱回流，直至燒瓶內油滴完全消失，停止皂化。

2. 甲酯化反應

• 從回流冷凝器上端緩慢加入 7 mL 15% 三氟化硼甲醇溶液，確保溶液全部流入圓底燒瓶。

• 繼續(xù)保持 80 ℃±1 ℃ 水浴回流 2 min，完成脂肪酸的甲酯化。

3. 冷卻與萃取

• 用少量蒸餾水自上而下沖洗回流冷凝器內壁，使附著的溶液流入圓底燒瓶。

• 取下圓底燒瓶，迅速置于室溫環(huán)境中冷卻至室溫。

• 向燒瓶中準確加入 10 mL~30 mL 正庚烷，塞緊瓶塞后劇烈振搖 2 min，使甲酯化產物充分溶解于正庚烷中。

• 向燒瓶中加入適量飽和氯化鈉水溶液，輕輕搖勻后靜置，待溶液分層完全。

4. 脫水凈化

• 用移液管吸取上層正庚烷萃取液約 5 mL，轉移至 25 mL 具塞試管中。

• 向試管中加入 3 g~5 g 無水硫酸鈉，塞緊塞子后振搖 1 min，使萃取液中的水分被充分吸附。

• 靜置 5 min，待無水硫酸鈉沉降完全。

5. 待測液制備

• 吸取上層澄清的正庚烷溶液，轉移至氣相色譜進樣瓶中，密封保存，待氣相色譜分析。